1.生物学特征
(1)形态与染色:鼠疫耶尔森菌为革兰阴性杆菌,形态短而粗,两端钝圆,两极浓染,大小为(1.0~2.0)μm(0.5~0.7)μm.有荚膜,无鞭毛,无芽孢。陈旧培养物或3%氯化钠琼脂培养基上呈明显多形性。
(2)培养:需氧和兼性厌氧,在普通培养基上即可生长。最适生长温度是28℃~30℃。培养基最适pH为6.9~7.1.培养16~18h,用显微镜观察可见一层形状不一,浅灰色小菌落,这是鼠疫耶尔森菌培养初期的菌落特征,这对本菌的鉴定有一定意义。在培养24~48h后可形成直径0.1~0.2mm,圆形。中心突出,透明的浅灰色小菌落。72h后菌落直径可达4mm.在液体培养基中生长良好,开始浑浊生长,24h后为沉淀生长,48h后形成菌膜,稍加震动菌膜呈钟乳石状下垂。
(3)生化反应:不活跃,在双糖铁培养基上可分解葡萄糖,少数菌株可分解乳糖,不产生硫化氢,MIU培养基无动力,不产生靛基质,尿素酶试验阴性。
2.微生物学检验
(1)标本采集:主要采集血液、痰和淋巴结穿刺液。
(2)检验方法及鉴定:鼠疫耶尔森菌为甲类病原菌,传染性极强,故应严格遵守检验操作规程,要求实验室有隔离设施,防鼠、防蚤和严密的个人防护措施;用过的实验器材及物品随时消毒处理。
1)直接涂片检查:一般制片两张,分别用于革兰染色和美蓝染色,可见革兰阴性球杆菌,形似芝麻,两端浓染。
2)分离培养:鼠疫耶尔森菌学检验中分离培养步骤十分重要,分离培养时未污染标本可直接接种血平板,污染标本则需接种选择性培养基,如龙胆紫亚硫酸钠琼脂。经28℃~30℃培养24~48h后,挑选菌落作鉴定。
3)鉴定:根据菌落特征,细菌形态和肉汤中呈“钟乳石”状发育,KIA结果利用葡萄糖,不利用乳糖,不产H2S,MIU均为阴性反应。为作最后鉴定应补充以下实验方法:①噬菌体裂解试验;②动物试验;③免疫学方法。
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