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　　网织红细胞成为成熟的红细胞的时间

　　红细胞主要在骨髓发生、发育与成熟，骨髓中的造血干细胞在多种刺激因素的作用下，依次演变为原始红细胞、早幼红细胞、中幼红细胞和晚幼红细胞，晚幼红细胞不再具备分裂能力，脱核后成熟为网织红细胞，整个过程需要72h。网织红细胞继续成熟，约48h后发育为成熟的红细胞。

　　测定血沉的方法

　　①魏氏法(Westergren法)：将离体抗凝血液置于特制刻度测定管内，垂直立于室温中，1h准红细胞层下沉距离，用毫米(mm)数值报告。

　　②血沉仪法：用发光二极管、光电管检测红细胞和血浆界面的透光度改变，得到血沉值，显示红细胞沉降高度(H)与时间(t)关系的H-t曲线。

　　抗凝剂与血液比例为1：4.

　　精子活动力分级

　　WHO建议将精子活动力分为4级：

　　①快速前向运动(Ⅲ级：直线运动);

　　②慢或呆滞的前向运动(Ⅱ级：运动缓慢);

　　③非前向运动(Ⅰ级：原地运动);

　　④不动(0级：不活动)。

　　参考值：WHO规定正常生育者精子活动力：射精后60min内，Ⅲ级精子应>25%;或Ⅲ和Ⅱ级精子的总和>50%.

　　ONPG的概念

　　(1)原理：有的细菌可产生β-半乳糖苷酶，能分解邻硝基酚β-D-半乳糖苷(ONPG)，而生成黄色的-硝基酚(O-nitrophenol)，在很低浓度下也可检出。

　　(2)试剂：0.75M ONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸馏水中，在加入缓冲液(6.9gNaH2PO4，溶于45ml蒸馏水中，用30%NaOH调整pH为7.0，再加水至50ml)5ml，置于4℃冰箱中保存。ONPG溶液为无色，如出现黄色，则不应再用。

　　(3)方法：从培养基上取菌，于0.25ml无菌生理盐水中制成菌悬液，加入一滴甲苯并充分振摇，使酶释放。将试管置37℃水浴5分钟，加入0.25ml ONPG试剂，水浴20分钟～3小时观察结果。

　　(4)结果：菌悬液呈现黄色为阳性反应，一般在20～30分钟内显色。

　　(5)应用：迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为阳性，而不发酵乳糖的细菌为阴性。本实验主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。

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