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　　抗原抗体反应

　　将抗原(标准品和受检标本)、标记抗原和抗血清按顺序定量加入小试管中，在一定的温度下进行反应一定时间，使竞争抑制反应达到平衡。不同质量的抗体和不同含量的抗原对温育的温度和时间有不同的要求。

　　如受检标本抗原含量较高，抗血清的亲和常数较大，可选择较高的温度(15～37℃)进行较短时间的温育，反之应在低温(4℃)作较长时间的温育，形成的抗原抗体复合物较为牢固。

　　抗血清的检定

　　含有特异性抗体的抗血清是放射免疫分析的主要试剂，常以抗原免疫小动物诱发产生多克隆抗体而得。抗血清的质量直接影响分析的灵敏度和特异性。抗血清质量的指标主要有亲和常数、交叉反应率和滴度。

　　1.亲和常数亲和常数(affinityconstant)常用K值表示。它反映抗体与相应抗原的结合能力。K值的单位为mol/L，即表示 1mol抗体稀释至若干L溶液中时，与相应的抗原结合率达到50%.抗血清K值越大，放射免疫分析的灵敏度、精密和准确度越佳。抗血清的K值达到 109～1012mol/L才适合用于放射免疫分析。

　　2.交叉反应率放射免疫分析测定的物质有些具有极为类似的结构，例如甲状腺素的T3、T4，雌激素中的雌二醇、雌三醇等。针对一种抗原的抗血清往往对于其类似物会发生交叉反应。

　　因此交叉反应率反映抗血清的特异性，交叉反应率过大将影响分析方法的准确性。交叉反应率的测定方法为用与抗血清相应抗原及其类似物用同法进行测定，观察置换零标准管50%时的量。以T3抗血清为例，置换零标准50%T3为1ng，其类似物T4则需 200ng，则其交叉反应率为：1/200=0.5%.

　　3.滴度滴度系指将血清稀释时能与抗原发生反应的最高稀释度。它反映抗血清中有效抗体的浓度。在放射免疫分析中滴度为在无受检抗原存在时，结合50%标记抗原时抗血清的稀释度。

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