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载玻片的清洗
1. 洗洁精加入清水若干,100℃,30min。
2. 软布沾洗洁净液洗刷玻片,不留死角。
3. 自来水冲洗玻片,并晾干。
4. 0.2%HCI液浸泡,≥4小时。
5. 自来水冲洗玻片。
6. 过蒸馏水3遍。
7. 摆在架上自然晾干。
8. 浸泡95%酒精。
9. 摆在架上自然晾干。
10. 冻存与-20℃,≥2小时,备用。
血涂片的制备步骤
(1)采血
静脉采血后,使用玻璃棒、毛细管、注射针头等在距载玻片一端1cm处加1滴抗凝血。
(2)推片
左手平执载玻片,或放在类似桌子等平坦地方,右手持推片从前方接近血滴,使血液沿推片边缘展开成适当的宽度,立即将推片与载玻片呈 30~45°角,轻压推片边缘将血液推制成厚薄适宜的血涂片,血涂片应呈舌状,头、体、尾清晰可见。
(3)干燥
将推好的血涂片在空气中晃动,使其迅速干燥。天气寒冷或潮湿时,应于37 ℃温箱中保温促干,以免细胞变形缩小。
(4)标记
在载玻片的一端用记号笔编号。
(5)染色
用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线,防止染液外溢。再将瑞氏染液滴在血膜上,至染液淹没全部血膜,染1分钟。加等量蒸馏水(或缓冲液)与染液混合再染5分钟。最后用蒸馏水把染液冲掉,用吸水纸吸干,自然干燥后,即可观察。
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