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　　(一)核酸的紫外吸收

　　在核酸分子中，由于嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键体系，因而具有独特的紫外线吸收光谱，一般在 260nm左右有最大吸收峰，可以作为核酸及其组份定性和定量测定的依据。

　　(二)核酸的变性、复性与杂交

　　1.核酸的变性

　　(1)核酸的变性：在理化因素作用下， 核酸分子中的氢键断裂，双螺旋结构松散分开，形成无规则单链结构的过程。变性核酸将失去其部分或全部的生物活性。核酸的变性并不涉及磷酸二酯键的断裂，其一级结构(碱基顺序)保持不变。

　　A型题：

　　DNA变性的原因是(　)

　　A.3’，5’磷酸二酯键的断裂

　　B.二硫键的断裂

　　C.互补碱基之间氢键断裂

　　D.碱基甲基化修饰

　　E.多核苷酸链解聚

　　『正确答案』C

　　『答案解析』DNA变性是指在某些理化因素的作用下，互补的碱基对间的氢键断裂。

　　(2)DNA变性后，它的一系列性质也随之发生变化：

　　①增(高)色效应：天然状态的DNA在完全变性后，紫外吸收(260nm)值升高,即增色效应。

　　②Tm值： 随DNA变性增加，260nm处的紫外光吸收值逐渐增加，该值达到最大值50%时的温度称为核酸的解链温度或融解温度，用“Tm”表示。

　　Tm值影响因素： GC含量，GC含量越高，Tm值越大;核酸分子量，核酸分子量越大，Tm值也越大。

　　A型题：

　　DNA的解链温度指的是(　)

　　A.A260nm达到最大值时的温度

　　B.A260nm达到最大值时的50%时的温度

　　C.DNA开始解链时所需要的温度

　　D.DNA完全解链时所需要的温度

　　E.A280nm达到最大值50%时的温度

　　『正确答案』B

　　『答案解析』DNA的变性从开始解链到完全解链，是在一个相当窄的温度范围内完成的，在这一范围内，紫外光吸收值达到最大值的50%时温度称为DNA的解链温度。

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