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一、A1
1、
【正确答案】 C
【答案解析】 荧光抗体技术包括标本制作、荧光抗体制备、荧光抗体染色和荧光显微镜检查等内容。
2、
【正确答案】 A
【答案解析】 荧光效率的决定因素是荧光素本身特性。
3、
【正确答案】 A
【答案解析】 光照发光是指发光剂(荧光素)经短波长的入射光照射后,电子吸收能量跃迁到激发态,在其回复至基态时,发射出较长波长的可见光(荧光)。
4、
【正确答案】 D
【答案解析】 抗体标记完成后,还应对标记抗体作进一步纯化,以去除未结合的游离的荧光素,纯化方法可采用透析法或层析分离法。
5、
【正确答案】 D
【答案解析】 异硫氰酸荧光素为黄色或橙黄色结晶粉末,易溶于水或乙醇等溶剂。呈现明亮的黄绿色荧光。其主要优点是:①人眼对黄绿色较为敏感;②通常切片标本中的绿色荧光少于红色荧光。
6、
【正确答案】 D
【答案解析】 免疫荧光显微技术实验的类型包括直接法、间接法、荧光抗体染色结果判断和双标记法。
7、
【正确答案】 B
【答案解析】 荧光素与蛋白质结合比率(F/P)是指荧光素结合到抗体蛋白上的量。F/P值越高,表明抗体分子结合的荧光素越多,反之则结合越少。
8、
【正确答案】 A
【答案解析】 荧光抗体染色技术中,直接法的特异性高,非特异荧光染色因素少。
9、
【正确答案】 B
【答案解析】 在制作标本过程中应力求保持抗原的完整性,并在染色、洗涤和封埋过程中不发生溶解和变性,也不会扩散至邻近细胞或组织间隙中去。标本切片要求尽量薄些,以利抗原抗体接触和镜检。组织材料可制备成石蜡切片或冷冻切片。细胞或细菌可制成涂片,涂片或印片制成后应迅速吹干、封装,置-10℃保存或立即使用。
10、
【正确答案】 A
【答案解析】 FITC的最大吸收波长为490~495nm。
11、
【正确答案】 C
【答案解析】 荧光显微镜的光源、物镜、滤板、聚光器与普通显微镜不同。
12、
【正确答案】 A
【答案解析】 作为标记的荧光素应符合以下要求:①应具有能与蛋白质分子形成共价键的化学基团,与蛋白质结合后不易解离,而未结合的色素及其降解产物易于清除。②荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率。③荧光色泽与背景组织的色泽对比鲜明。④与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的生化与免疫性质。⑤标记方法简单、安全无毒。⑥与蛋白质的结合物稳定,易于保存。
13、
【正确答案】 C
【答案解析】 用于标记抗体的荧光素应符合一系列的要求,其中为了观察方便荧光色泽与背景应当对比鲜明。
14、
【正确答案】 B
【答案解析】 本题考查荧光强度与荧光物质及样品的关系。要使荧光强度与荧光物质的浓度成正比,应使样品浓度适中。
15、
【正确答案】 D
【答案解析】 异硫氰酸荧光素呈明亮的黄绿色荧光;四乙基罗丹明呈橘红色荧光;四甲基异硫氰酸罗丹明呈橙红色荧光;藻红蛋白呈明亮的橙色荧光。
16、
【正确答案】 C
【答案解析】 荧光偏振免疫测定样品用量少;荧光素标记结合物稳定,使用寿命长;方法重复性好;快速,易自动化;试剂盒专属性强,适于检测小分子和中等分子物质,不适宜测定大分子物质;灵敏度较非均相荧光免疫测定法低。
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