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A:苷元相同时,以含水移动相洗脱,被吸附的强弱顺序为: 苷元>单糖苷>双糖苷>双糖键苷。
B:与酚羟基的数目有关,数目越多,吸附力越强。与酚羟基的位置有关,如果酚羟基所处的位置易形成分子内氢键,则吸附力减弱。
查耳酮>二氢黄酮, 黄酮>二氢黄酮
C:不同类型黄酮类化合物,被吸附的强弱顺序为:黄酮醇>黄酮>二氢黄酮>异黄酮。
D:分子内芳香化程度越高,共轭双键越多,则吸附力越强。
3、葡聚糖凝胶色谱法
凝胶类型:Ssephadex LH-20和Sephadex G两种类型的凝胶。
分离苷元时:利用吸附作用,游离酚羟基数目越多,则吸附力越强,越难洗脱。
分离苷时:主要靠分子筛,洗脱时按苷分子量由大到小的顺序依次被洗脱出柱体。
黄酮类化合物 取代基 Ve/Vo
芹菜素 5,7,4‘-三羟基 5.3
木犀草素 5,7,3‘,4’-四羟基 6.3
槲皮素 3,5,7,3',4'-五羟基 8.3
杨梅素 3,5,7,3‘,4’,5‘-六羟基 9.2
山柰酚-3-鼠李糖基 三糖苷 3.3
半乳糖-7-鼠李糖苷
槲皮素-3-芸香糖苷 双糖苷 4.0
槲皮素-3-鼠李糖苷 单糖苷 4.9
常用的洗脱剂:碱性水溶液,含盐水溶液、醇及含水醇
(二)PH梯度法:用不同浓度的碱分离
(三)硼酸络合法 具有邻二酚羟基的黄酮类化合物可与硼酸络合生成易溶于 水的化合物。
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