复习总结：甾体激素类药物

    ⑤温度与时间的影响：一般室温或30℃恒温条件下显色。中国药典多数25℃暗处反应40～45min. 4.异烟肼比色法甾体激素C3-酮基及某些其他位置上的酮基都能在酸性条件下与羰基试剂异烟肼缩合形成黄色异烟腙，在一定波长下具有最大吸收。

    某些具有两个酮基的甾体激素可形成双腙，如黄体酮、可的松和氢化可的松等。

    本法主要用于甾体激素制剂的测定，如倍他米松软膏、哈西奈德软膏、倍他米松磷酸钠及其注射液等的含量测定。

    讨论：①溶剂的选择：只用用无水乙醇和无水甲醇才能得到满意的结果，其他溶剂因受到异烟肼盐酸盐在其中溶解度的限制不能采用。

    ②酸的种类和浓度以及异烟肼的浓度：当酸与异烟肼试剂的摩尔比为2：1时可获得最大吸收度。

    ③水分、温度、光线和氧的影响：当溶剂中含水量增高，吸收度随之降低。温度升高，反应加速。当在具塞玻管中不致使溶剂挥发及吸收水分的情况下，光与氧不影响反应。

    ④关于反应的专属性：具有Δ4-3-酮基的甾体激素在室温不到1h即可定量地与酸性异烟肼反应。其他甾酮化合物需在长时间放置或加热后方可反应完全，因此在上述反应条件下，本法对Δ4-3-酮甾体具有一定的专属性。

    5.Kober反应比色法Kober反应是指雌激素与硫酸-乙醇共热呈色，用水或稀硫酸稀释后重新加热发生颜色改变，并在515nm附近有最大吸收。

    Kober反应有两步：①与硫酸-乙醇光热产生黄色，在465nm处有最大吸收；②加水或稀硫酸稀释，重新加热显桃红色，在515nm处有最大吸收。

    中国药典采用本法测定炔雌醇片及复方炔诺孕酮片、复方炔诺孕酮滴丸、复方左炔诺孕酮滴丸中的炔雌醇的含量。

    维生素类药物维生素A维生素A的结构为具有一个共轭多烯侧链的环己烯，因而具有许多立体异构体。

    天然维生素A主要是全反式维生素A.性质：具紫外吸收，易氧化变质，能与三氯化锑呈色，与氯仿、乙醚、环己烷或是由醚任意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶。

    鉴别试验①三氯化锑反应（Carr-price反应）：维生素A在饱和无水三氯化锑的无醇氯仿溶液中，即显蓝色，渐变成紫红色。

    ②紫外吸收光谱：维生素A分子中含有5个共轭双键，其无水乙醇溶液在波长326nm处有最大吸收。当在演算催化下加热，则发生去水反应而生成脱水维生素A.后者比维生素A多一个共轭双键，使其最大吸收峰红移，同时在350～390nm波长范围内出现3个最大吸收峰。

    ③薄层色谱：以硅胶G为吸附剂，环己烷-乙醚（80：20）为流动相。

    含量测定：紫外分光光度法（三点校正法）

    原理：本法是在三个波长处测定吸收度，根据校正公式计算吸收度A校正值后，再计算含量，故本法亦称“三点校正法”。原理如下：

    ①杂质的吸收在310～340nm波长范围内呈一条直线，且随波长的增大，吸收度变小。

    ②物质对光的吸收具有加和性。

    三点波长的选择法①第1点：选择维生素A的最大吸收波长（即λ1）。

    ②第2点和第3点：在最大吸收波长的两侧各选一点（即λ2和λ3）。

    等波长差法：在λ1的左右各选一点为λ2和λ3，使λ3—λ1＝λ1—λ2.维生素A醋酸酯。

    等吸收法：在λ1的左右各选一点为λ2和λ3，使Aλ2= Aλ3=6/7 Aλ1.维生素A醇。

    ③杂质吸收：对维生素A的测定有影响的杂质主要有：

    维生素A2和维生素A3；维生素A的氧化产物（环氧化物、维生素A醛和维生素A酸）；维生素A在光照下产生的无生物活性的聚合物鲸醇；维生素A