2013执业药师考试药物分析复习讲义(7)

　　第七章 体内药物分析法

　　治疗药物监测(Therapeutic Drug Monitoring， TDM)

　　第一节 体内样品的种类

　　体内样品包括各种体液和组织。主要包括血液、尿液、唾液。 最为常用的样本是血液。

　　体内样品的采集时间：根据临床治疗药物监测的不同目的确定。

　　一 血样

　　血样包括全血(whole blood)、血浆(plasma)和血清(serum)，是最为常用的体内样品。

　　1. 血样(全血)的采集

　　采集后置含有抗凝剂的试管中，常用的抗凝剂有肝素、EDTA、草酸盐、枸橼酸盐等。

　　2. 血浆的制备 更为常用

　　将采集的全血置含有抗凝剂的试管中， 离心， 分取上清液即为血浆。

　　3. 血清的制备

　　将采集的全血在室温下放置至少0.5～1.0h，待血液凝固后，再离心，分取上清液即为血清。

　　血样采集后应及时分离血浆或血清，并最好立即分析。否则，短期保存时可置冰箱冷藏(4℃)，长期保存需在-20℃或-80℃下冷冻贮藏。全血未经分离时不宜直接冷冻保存。

　　若待测药物在样本中易受酶或酸碱等的作用发生进一步变化，可选用的处置方法包括低温冷冻、调节酸碱度、加酶抑制剂等。

　　二 尿液

　　尿液浓度测定主要用于药物尿液累积排泄量、尿清除率或生物利用度的研究，以及药物代谢物及其代谢途径、类型和速率等的研究。临床上亦可推断患者是否违反医嘱用药。

　　尿液样品的采集和测定应当与肾功能指标进行关联分析。

　　测定尿液中药物浓度时应采用时间尿 。测定尿液中药物的总量时，应收集用药后一定时间内的全部尿液，进行分析。

　　一 唾液

　　唾液是腮腺、颌下腺、舌下腺和口腔黏膜腺体分泌的黏液在口腔里混合而成的消化液。

　　唾液的采集方法：尽可能在安静状态下进行，一般在漱口后15min收集，1min内大约可采集1ml。采集后应立即测量其除去泡沫部分的体积，离心，分取上清液。

　　第一节 体内样品处理

　　一、 体内样品处理的目的：减少干扰、提高检测灵敏度和特异性、降低对仪器的污染和损害。

　　二、 体内样品处理的常用方法

　　血浆或血清需除蛋白;尿液样品常采用酸或酶水解使药物从缀合物中释出;唾液样品则主要采用离心沉淀除去粘蛋白。

　　体内样品处理常用方法有：去除蛋白质法、缀合物水解法、分离纯化与浓集法、化学衍生化法

　　(一) 去除蛋白质法

　　去除蛋白质常用的方法包括蛋白沉淀法和蛋白分解法。

　　1. 蛋白沉淀法 常用的方法包括：加入有机溶剂、强酸和无机盐。

　　(1) 加入与水混溶的有机溶剂

　　水溶性的有机溶剂可使蛋白质分子内及分子间的氢键变化，使蛋白质凝聚，进而使与之结合的药物释放。

　　常用的水溶性有机溶剂有：乙腈、甲醇、丙酮、四氢呋喃等。

　　乙腈沉淀蛋白质为絮状，易于离心去除;甲醇沉淀蛋白则为细小颗粒状，需高速离心去除。使用乙腈或甲醇时上清液pH为8.5~9.5，使用丙酮时上清液pH为9~10。