2010执业药师考试药学专业知识(一)复习要点(12)

　　(一)鉴别 供试液主峰的保留时间与对照液一致

　　(二)杂质检查 《中国药典》用HPLC杂质检查方法有5种

　　1)内标法加校正因子

　　校正因子( f ) =(As /Cs) / (AR/CR) 含量 (Cx) = f · Ax / (AS /CS )

　　2)外标法 含量 (Cx) = CR · (Ax / AR)

　　3)加校正因子的主成分自身对照法：对照溶液为供试品溶液的稀释溶液

　　4)不加校正因子的主成分自身对照法 无杂质对照品

　　5)面积归一化法

　　(三)含量测定 内标法加校正因子法、外标法

　　§4. 气相色谱法 gas chromatography， GC

　　一、基本原理

　　采用气体流动相;不适于难挥发和热稳定性差的物质的分析;各组分按K大小顺序依次被载气带出色谱柱产生分离

　　二、气相色谱仪

　　(一)载气源 FID多用氮气或氦气为载气，氢气为燃气，空气为助燃气。TCD多用氦气或氢气为载气;ECD多用氮气或氩气为载气。

　　(二)进样方式 可分为溶液直接进样、顶空进样

　　(三)色谱柱 填充柱或毛细管柱

　　(四)柱温箱 控温精度在±1℃

　　(五)检测器：

　　1.火焰离子化检测器(FID)

　　氢气为燃气，空气为助燃气。检测器温度应高于柱温，并不低于150℃®¾防水气凝结，(否则倒流)，通常为 250 ℃ - 350 ℃

　　2. 氮磷检测器NPD 适于含氮、磷元素的药物

　　3. 火焰光度检测器FPD 适于含氮、硫元素的药物

　　4. 电子捕获检测器ECD 主要用于含卤素药物

　　5. 质谱检测器MS 能给出相应的结构信息

　　6. 热导检测器 TCD 检测组分的浓度变化

　　浓度型：TCD、电子捕获检测器ECD

　　(六)数据处理系统

　　三、常用固定液与载体

　　1. 常用的固定液：常用的鲨鱼烷是标准非极性固定液

　　硅氧烷类 ：SE-30、SE-54、OV-17、OV-25等

　　醇类：聚乙二醇(PEG)是最常用的固定液之一

　　2. 载体(担体) 作用：承载固定液

　　为化学惰性的多孔性微粒，常用硅藻土型载体：红色载体和白色载体。

　　3. 毛细管色谱柱：开管型毛细管柱和填充型毛细管柱

　　★★四、色谱系统适用性试验

　　在各品种项下规定色谱条件下，除检测器种类、固定液品种及特殊指定的色谱材料不得改变外，其余如色谱柱内径、长度、载体牌号、粒度、固定液涂布浓度、载气流速、柱温、进样量、检测器的灵敏度等，均可适当改变。

　　(1)色谱柱的理论踏板数(n) n=5.54(tR/ Wh/2)2

　　(2) 分离度 (R) R=2(tR2-tR1)/(W1+W2) R ³ 1.5

　　(3)重复性： RSD ≤2.0%

　　(4)拖尾因子(T)： 0.95 ~ 1.05

　　六、应用

　　(一)鉴别 供试液主峰的保留时间与对照品溶液一致

　　(二)杂质检查： 内标法加校正因子、外标法、面积归一化法和标准溶液加入法

　　(三)在含量测定中的应用： 内标法、外标法和标准溶液加入法

　　§5. 电泳法 (electrophoresis)

　　在电场的作用下，带电颗粒向其所带电荷相反的电极方向移动， 根据各组分淌度的不同而得到分离的方法。

　　(一)基本原理

　　v=mE

　　双电层与电渗：电泳所用的支持物(如滤纸)在溶液中带负电，而使接近其表面的缓冲液带正电，且形成双电层。在电场的作用下，带正电的缓冲液整体向负极移动，形成电渗。

　　影响电泳分离的条件：(1)缓冲液的pH值和离子强度 (2)电场强度 (3)样品浓度

　　★★(二)各类电泳法

　　(1) 纸电泳法

　　(2) 醋酸纤维素薄膜电泳法

　　(3) 琼脂糖凝胶电泳法

　　(4) 聚丙烯酰胺凝胶电泳法

　　(5) SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 测定蛋白质分子量

　　(三)应用 鉴别、分子量测定、纯度测定

　　二、毛细管电泳法(capillary electrophoresis，CE)

　　毛细管电泳的分离模式：

　　1.毛细管区带电泳(CZE)

　　2.毛细管凝胶电泳(CGE)

　　3.毛细管等速电泳(CITP)

　　4.毛细管等电聚焦电泳(CIEF)

　　5.胶束电动毛细管色谱 (MEKC或MECC)

　　6.毛细管电色谱(CEC)