2014执业药师考试《药学专业一》药理学重点(20)

生物样品分析前处理技术

　　血样、组织(去蛋白)、唾液(去除黏蛋白)、尿液(缀合物水解)

　　去除蛋白质：

　　(1) 加入与水相混溶的有机溶剂(甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、丙醇、四氢呋喃)。 原理：可使蛋白质的分子内及分子间的氢键发生变化而使蛋白质凝聚，使与蛋白质结合的药物释放出来。可除去90%蛋白

　　(2) 加入中性盐，如(NH4)2SO4，Na2SO4等。原理：离子强度发生变化，脱水。可除去90%蛋白

　　(3) 加入强酸(10%三氯乙酸、6%高氯酸等)pH值低于蛋白质等电点pH 时，与蛋白质阳离子形成不溶性盐而沉淀。可除去90%蛋白

　　(4) 加入Zn2+、Cu2+，pH值高于蛋白质等电点 pH时，与蛋白质阴离子形成不溶性盐而沉淀。

　　(5) 酶解法(蛋白水解酶——枯草菌溶素)使组织酶解，释放出药物，不会发生乳化，对与蛋白结合牢固的药物可显著改善回收率。碱不稳定药物不宜用

　　缀合物的水解：酸水解、酶水解

　　有机破坏

　　分离、纯化与浓集：

　　(1)液-液萃取(LLE)

　　(2)液-固萃取(LSE)：即一种柱色谱分离方法

　　(3)浓集：①末次萃取时加入萃取量尽量减少;②挥去萃取溶剂法(氮气吹干或减压法);③柱切换HPLC 法

　　化学衍生化

炽灼后的硫代乙酰胺法

　　适用范围：适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇及碱的有机药物。

　　注意事项：

　　① 温度对重金属检查影响较大，温度越高重金属损失越多，应控制炽灼温度 500-600℃(高温易挥发).

　　② 残渣加硝酸加热处理后，必须蒸干，除尽氧化氮，否则亚硝酸可氧化硫化氢析出硫，影响比色。

　　③ 含钠及氟的有机药物应用铂坩埚、石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿，因可腐蚀瓷坩埚带入重金属。

氯化物检查法

　　原理：对照法。 利用氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银胶体微粒而显白色混浊液，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银混浊程度比较，浊度不得更大。 Cl-+Ag+—>AgCl↓(白)

　　注意事项：

　　① 氯化物浓度以50ml溶液中含50～80μg的Cl为宜，因为此时浊度梯度好。

　　② 加硝酸可避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的干扰，加速AgCl的生成并产生较好的乳光浑浊

　　③ 酸度要求：50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜

　　④ 供试品溶液有颜色时的处理方法：内消色法：

　　⑤ 供试品溶液显碱性的处理方法：先中和成中性后再检查(加硝酸)

　　⑥ 供试品溶液不澄清的处理方法：过滤，之前要用硝酸冲洗滤纸。

铁盐检查法

　　方法：①硫氰酸盐法 Ch.P、USP;②巯基醋酸法 BP

　　原理：铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵溶液作用生成红色可溶性的硫氰酸铁配离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比色。 Fe3+ +nSCN-→[Fe(SCN)n]3-n (n=1~6)

　　注意事项：

　　① 准铁贮备液的配制：用硫酸铁铵[FeNH4(SO4)2•12H2O]配制成标准铁储备液，并加入硫酸防止铁盐水解，使易于保存。

　　② 铁盐的最适检测浓度范围：目视比色时以50ml溶液中含有10-50μgFe3+为宜，所显色泽梯度明显。

　　③ 应在盐酸酸性条件下进行：加入盐酸可防止Fe3+水解，并避免弱酸盐如醋酸盐、磷酸盐、砷酸盐等的干扰

　　④ 入过硫酸胺的目的：为了氧化Fe2+为Fe3+，同时可防止由于光照使硫氰酸铁还原或分解褪色。

　　2 Fe2++(NH4)2S2O8 →2 Fe3++(NH4)2SO4+SO42-

　　⑤ 为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时，可用正丁醇或异戊醇提取后，分取醇层比色。例：枸橼酸钠中铁盐的检查

　　⑥ 硫氰酸铵过量：增加配位离子的稳定性，提高反应灵敏度，还能消除Cl-、PO43-、SO42-、枸橼酸跟离子等与铁盐形成配位化合物而引起的干扰。

　　相关推荐：

　　2014执业药师复习备考四大注意事项

　　2014执业药师《药学专业二》药剂学考点汇总

　　2014执业药师考试《药学专业二》重要知识点汇总