文章责编:wangyuchun00
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第 1 页:第一节 概论 |
第 2 页:第二节 薄层色谱法 |
第 3 页:第三节 高效液相色谱法 |
第 4 页:第四节 气相色谱法 |
第 5 页:第五节 电泳法 |
第二节 薄层色谱法
一、基本原理
吸附剂对不同组分A和B具有不同吸附能力,展开剂也对A和B有不同溶解、解吸能力,当展开剂不断展开,A、B在吸附剂和展开剂之间连续不断吸附解吸,产生差速迁移得到分离。
二、固定相
1.硅胶:含水量越高,活性越低,吸附力越弱。在105~110℃加热30min,使其活化。硅胶G、硅胶H、硅胶GF254、硅胶HF254的含义
2.氧化铝:碱性、中性和酸性三种。活性与含水量有关
3.聚酰胺:可与酚羟基、羧基、氨基酸形成氢键,选择性高
三、操作方法
1.制备:1份固定相与3份水混和涂布,110℃烘30分钟
2.点样与展开:点样一般为直径2~4mm圆点,距底2.0cm;展开距离一般为10~15cm。
3.检视:荧光板在紫外光下检视;普通薄层板用物理方法或显色剂显色。
4.系统适用性试验
比移值:Rf=l/l0,为组分迁移距离与展开剂迁移距离之比
比移值的最佳范围是0.3~0.5,可用范围是0.2~0.8。
影响比移值因素:①被分离物质的结构和性质。极性较强的组分Rf较小。②薄层板性质。吸附剂活性越强,Rf较小。③展开剂性质。极性越强展开剂Rf值增大④展开剂蒸气饱和程度。
3.分离度:R=2d/(W1+W2),两相邻斑点中心距离与两斑点平均宽度的比值
四、应用
1.鉴别:比较供试品与对照品溶液的比移值
2.杂质检查:杂质对照品比较法;自身稀释对照法
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