2015年执业药师《药物分析》考试复习讲义（30）

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左炔诺孕酮及炔雌醚高效液相色谱法

　　方法名称：左炔诺孕酮片-左炔诺孕酮及炔雌醚-高效液相色谱法

　　应用范围：本方法采用高效液相色谱法测定左炔诺孕酮片中左炔诺孕酮与炔雌醚的含量。

　　本方法适用于左炔诺孕酮片。

　　方法原理：供试品研细，经流动相稀释并加入内标后，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长220nm处检测左炔诺孕酮与炔雌醚的峰面积，计算出其含量。

　　试剂：乙腈

　　仪器设备：

　　1.仪器

　　1.1高效液相色谱仪

　　1.2色谱柱

　　十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按左炔诺孕酮峰计算应不低于3000.

　　1.3紫外吸收检测器

　　2.色谱条件

　　2.1流动相：乙腈水=80202.2检测波长：220nm

　　2.3柱温：室温

　　试样制备：

　　1.内标溶液的制备

　　精密称取己酸孕酮适量，加乙腈制成每1mL中约含0.12mg的溶液，摇匀，即为内标溶液。

　　2.对照品溶液的制备

　　精密称取左炔诺孕酮与炔雌醚对照品适量，用流动相制成每1mL中约含左炔诺孕酮0.12mg与炔雌醚0.06mg的对照品溶液，精密量取两种对照品溶液与内标溶液各1mL，混匀，即为对照品溶液。

　　3.供试品溶液的制备

　　取供试品20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于左炔诺孕酮6mg)，置50mL量瓶中，加流动相适量，超声处理使溶解，放至室温，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液与内标溶液各1mL，混匀，即为供试品溶液。

　　注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

　　操作步骤：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长240nm处测定左炔诺孕酮(C21H28O2)与炔雌醚(C25H32O2)的峰面积，计算出其含量。

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