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三、显微鉴定
鉴定内容:
①完整药材的显微鉴定:横切片或纵切片
②破碎药材的显微鉴定:组织片(横切片或纵切片)、解离组织片
③粉末药材的显微鉴定:粉末片
④中成药的显微鉴定:同粉未鉴定的方法。
(一)显微制片方法
1、横切面或纵切片制片 完整药材,选取要观察的部位,软化后切成10~20μm薄片,根据不同观察对象,滴加试液。
2、表面制片 切取或撕去表皮
3、粉末制片
4、解离组织片 将供试品切成长约5mm,直径约2mm的段或厚约1mm的片,如薄壁组织占大部分,木化组织少可用氢氧化钾法;如质地坚硬,木化组织较多或集成较大群束,可用硝铬酸法或氯酸钾法。
5、花粉粒与孢子制片
6、磨片制片 坚硬的矿物药、动物药。1~2mm
7、含粉末药材的制剂显微制片
(二)植物细胞壁和内含物的鉴别
1、细胞壁性质的鉴别:木质化细胞壁:间苯三酚,显红色或紫红色;木栓化(角质化)细胞壁:苏丹Ⅲ号,加热后显红色;纤维素细胞壁:氯化锌碘试液,显蓝色或紫色;硅质化细胞壁:硫酸无变化
2、 细胞内含物的鉴定
淀粉粒:加碘试液,蓝色或紫色。用甘油醋酸处理后,未糊化的淀粉粒有偏光,糊化的无偏光。
糊粉粒:加碘显棕色,加硝酸汞,显砖红色。
脂肪油:加苏丹Ⅲ号,显橘红色、红色或紫色。加90%乙醇脂肪油不溶解,挥发油溶解。
菊糖:加10%а-萘酚乙醇液,再加硫酸,现紫红色并很快溶解。
粘液:加钌红试液,显红色。
草酸钙结晶:1、加稀醋酸不溶解,加盐酸溶解。2、加硫酸,逐渐溶解,然后又析出针状结晶。
碳酸钙结晶:加稀盐酸溶解并有气泡产生。
硅质块: 加硫酸不溶解
(三)显微测量 在显微镜下测量细胞及内含物的大小,可用目镜测微尺测量。
(四)显微常数 主要有用于叶类鉴别的气孔数、气孔指数、栅表比、脉岛数和脉端数等
(五)显微临时制片常用的封藏液
水、稀甘油:用来观察淀粉粒、油滴、树脂等细胞内含物及细胞壁的颜色
甘油醋酸试液:常用封藏剂,使淀粉粒不膨胀变性,特别适于观察淀粉粒和显微测量。
水合氯醛试液:常用的透化剂。方便观察细胞的形状和组织构造以及细胞内含有的各种晶体。
(六)扫描电子显微镜和偏光镜的应用
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