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执业医师考试
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2012临床医师诊断基础辅导:速率散射比浊分析

速率散射比浊分析:基本原理、抗原过量检测。

  (一)基本原理

  速率散射比浊分析是一种动力学测定方法,在一定条件下,抗原和相应的抗体很快结合成抗原抗体免疫复合物颗粒,速率比浊法就是在一定时间内抗原抗体结合过程中,测定二者结合的最大反应速度,即反应达顶峰峰值。所谓速率是抗原抗体结合反应过程中,在单位时间内两者结合的速度。速率法是测定最大反应速率,即在抗原抗体反应达最高峰时,通常为数十秒钟,测定其复合物形成的量。峰值的高低在抗体过量情况下与抗原的量成正比。峰值出现的时间与抗体的浓度及其亲和力直接相关。不同抗原含量其速率峰值不同,通过微电脑处理,求出抗原含量。

  (二)抗原过量检测

  附:终点散射比浊法

  其原理是让抗原抗体作用一定时间,使其反应达到平衡后,测定其复合物的量。复合物的浊度不再受时间的影响,但反应复合物聚合产生絮状沉淀之前(大约反应数十分钟)进行浊度测定。敏感度达mg/L水平,可自动化,但反应时间较长。

  免疫胶乳比浊法

  原理:选择一种大小适中,均匀一致的胶乳颗粒,吸附抗体后,当遇到相应抗原时,则发生凝集,单个胶乳颗粒在入射光波长之内,光线可透过,当两个胶乳凝集时,则使透过光减少。这种减少的程度与胶乳凝集成正比,与抗原量成正比。该法敏感度高,试剂稳定,因反应液中无PEC沉淀剂的影响,个体IC对结果影响也小,所以结果稳定、可靠,特异性好;不需特殊仪器设备,一般分光光度计、自动化生化分析仪或散射比浊仪均可使用。

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