自考生物化学（三）模拟试题及答案三

　　一、A型题(每小题1分)

　　1. 在分子生物学领域，分子克隆主要是指(A)

　　A.DNA的大量复制

　　B.DNA的大量转录

　　C.DNA的大量剪切

　　D.RNA的大量反转录

　　E.RNA的大量剪切

　　2.在分子生物学领域，重组DNA又称(D)

　　A.酶工程

　　B.蛋白质工程

　　C.细胞工程

　　D.基因工程

　　E.DNA工程

　　3.在重组DNA技术中，不常用到的酶是(E)

　　A.限制性核酸内切酶

　　B.DNA聚合酶

　　C.DNA连接酶

　　D.反转录酶

　　E.DNA解链酶

　　4.多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为(D)

　　A.平头末端

　　B.3'突出末端

　　C.5'突出末端

　　D.粘性末端

　　E.缺口末端

　　5.可识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶称为(B)

　　A.限制性外切核酸酶

　　B.限制性内切核酸酶

　　C.非限制性外切核酸酶

　　D.非限制性内切核酸酶

　　E.DNA内切酶

　　6.cDNA是指(A)

　　A. 在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA

　　B.在体外经反转录合成的与DNA互补的DNA

　　B. 在体外经转录合成的与DNA互补的RNA

　　D.在体内经反转录合成的与RNA互补的DNA

　　E.在体内经转录合成的与DNA互补的RNA

　　7.基因组代表一个细胞或生物体的(B)

　　A.部分遗传信息 B.整套遗传信息 C.可转录基因

　　D.非转录基因 E.可表达基因

　　8.在基因工程中通常所使用的质粒存在于(C)

　　A.细菌染色体 B.酵母染色体 C.细菌染色体外

　　D.酵母染色体外 E.以上都不是

　　9.就分子结构而论，质粒是(A)

　　A.环状双链DNA分子 B.环状单链DNA分子 C.环状单链RNA分子

　　D.线状双链DNA分子　　E.线状单链DXlA分子

　　10.聚合酶链反应可表示为(E)

　　A.PEC B.PER C.PDR D. BCR E.PCR

　　11.在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是(D)

　　A.化学合成法 B.基因组文库法 C.cDNA文库法

　　D.聚合酶链反应 E.差异显示法

　　12.重组DNA的基本构建过程是将(C)

　　A.任意两段DNA接在一起 B. 外源DNA接入人体DNA

　　C.目的基因接入适当载体 D.目的基因接入哺乳类DNA E.外源基因接入宿主基因

　　13.催化聚合酶链反应的酶是(E)

　　A.DNA连接酶

　　B.反转录酶

　　C.末端转移酶

　　D.碱性磷酸酶

　　E.TaqDNA聚合酶

　　14.将内切酶切割后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属(D)

　　A. 同聚物加尾连接 B.人工接头连接 C.平端连接

　　B. D.粘性末端连接 E.非粘性末端连接

　　15.限制性核酸内切酶切割DNA后产生(B)

　　A.3'磷酸基末端和5'羟基末端 B.5'磷酸基末端和3'羟基末端

　　C.3'磷酸基末端和5'磷酸基末端 D.5'羟基末端和3'羟基末端

　　E.3'羟基末端、5'羟基末端和磷酸

　　16.重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是(D)

　　A.DNA聚合酶 B.RNA聚合酶 C. DNA连接酶

　　D.RNA连接酶 E.限制性核酸内切酶

　　17.以质粒为载体，将外源基因导人受体菌的过程称(A)

　　A.转化 B.转染 C.感染 D，转导 E.转位

　　18.最常用的筛选转化细菌是否含质粒的方法是(B)

　　A.营养互补筛选 B.抗药性筛选 C.免疫化学筛选

　　D.PCR筛选 E.分子杂交筛选

　　19.互补筛选法属于(C)

　　A. 抗药性标志筛选 B.酶联免疫筛选 C.标志补救筛选

　　D.原位杂交筛选 E.免疫化学筛选

　　20.下列常用于原核表达体系的是(E)

　　A. 酵母细胞 B.昆虫细胞 C.哺乳类细胞 D.真菌 E. 大肠杆菌

　　21.在对目的基因和载体DNA进行同聚物加尾时用(E)

　　A.反转录酶 B.多聚核苷酸激酶 C.引物酶 D.RNA聚合酶 E.末端转移酶

　　22.重组DNA技术常用的限制性核酸内切酶为(B)

　　A.Ⅰ类酶 B.Ⅱ类酶 C.Ⅲ类酶 D.Ⅳ类酶 E.Ⅴ类酶

　　23.在分子生物学领域，分子克隆专指(C)

　　A.细胞克隆 B.RNA克隆 C.DNA克隆 D.抗体克隆 E.mRNA克隆

　　24.用于重组DNA的限制性核酸内切酶识别核苷酸序列的(D)

　　A.正超螺旋结构 B.负超螺旋结构 C.螺旋结构 D.回文结构 E.锌指结构

　　25.在基因工程中通常所使用的质粒是(B)

　　A.细菌的染色体DNA B.细菌染色体外的DNA C.病毒染色体DNA

　　D.病毒染色体外的DNA E.噬菌体DNA

　　26.构建基因组DNA文库时，首先需分离细胞的(A)

　　A.染色体DNA B.线粒体DNA C.总mRNA D.tRNA E.rRNA

　　27.建cDNA文库时，首先需分离细胞的(C)

　　A.染色体DNA B.线粒体DNA C.总mRNA D.tRNA E.rRNA

　　28.设计聚合酶链反应的引物时，应考虑引物与模板的(C)

　　A.5'端特定序列互补 B.5'端任意序列互补

　　C.3'端特定序列互补 D.3'端任意序列互补 E.中间序列互补

　　29.用于鉴定转化子细胞是否含重组DNA的最常用方法是(A)

　　A.抗药性选择 B.分子杂交选择 C.RNA反转录 D.免疫学方法 E.体外翻译

　　30.确切地讲，cDNA文库包含 (E)

　　A.一个物种的全部基因信息 B.一个物种的全部mRNA信息

　　C. 一个生物体组织或细胞的全部基因信息

　　D.一个生物体组织或细胞的全部mRNA信息 E.一个生物体组织或细胞所表达mRNA信息

　　31.利用聚合酶链反应扩增特异DNA序列重要原因之一是(C)

　　A. 反应体系内存在特异DNA模板 B.反应体系内存在特异RNA模板

　　C.反应体系内存在特异DNA引物 D.反应体系内存在特异RNA引物

　　E. 反应体系内存在的TaqDNA聚合酶具有识别特异DNA序列的作用

　　32.表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是(E)

　　A.E.coli表达体系 B.原核表达体系 C.酵母表达体系

　　D.昆虫表达体系 E.哺乳类细胞表达体系

　　33.下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是(D)

　　A.小型环状双链DNA分子 B.携带有某些抗药性基因

　　C.在细胞分裂时恒定地传给子代细胞 D.具有自我复制功能 E.获得目的基因

　　二、B型题(每小题1分)

　　A.抗药性选择

　　B.分子杂交选择

　　C.RNA反转录

　　D.免疫学方法

　　E.体外翻译

　　1.用于鉴定是否有质粒转入受体菌的一般方法是(A)

　　2.用于鉴定转化子细胞是否含目的基因的常用方法是 (B)

　　3.利用目的基因表达产物的特异性抗体来筛选含目的基因的转化子细胞的方法是(D)

　　A.限制性核酸内切酶 B.DNA连接酶 C.反转录酶

　　C. TaqDNA聚合酶 E.碱性磷酸酶

　　4.识别DNA回文结构并对其双链进行切割的是(A)

　　5.用于聚合酶链反应的酶是(D)

　　6.将目的基因与载体DNA进行拼接的酶是(B)

　　A.支原体 B.衣原体 C.噬菌体 D.细菌 E.酵母

　　7.常用作原核表达体系的是(D)

　　8.常用作真核表达体系的是(E)

　　A.基因组文库

　　B.cDNA文库

　　C.mRNA文库

　　D.tRNA文库

　　E.rRNA文库

　　9.分离细胞染色体DNA可制备(A)

　　10.分离细胞总mRNA可制备(B)

　　A.转染

　　B.转化

　　C.感染

　　D.转导

　　E.转位

　　11.以质粒为载体，细菌为宿主的导人方式是(B)

　　12.以噬菌体为载体，细菌为宿主的导人方式是(A)

　　13.以病毒为载体，哺乳动物细胞株为宿主的导人方式是(C)

　　A.抗药性选择 B.RNA反转录 C.免疫化学方法 D.体外翻译 E.PCR

　　14.对重组体进行直接选择的方法是(A)

　　15.通过鉴定基因表达产物筛选重组体的方法是(C)

　　A.RNA聚合酶 B.末端转移酶 C.碱性磷酸酶 D.反转录酶 E.核苷酸酶

　　16.切除DNA末端磷酸基用(C)

　　17.在DNA3'羟基末端进行同聚物加尾用(B)

　　18.合成cDNA用(D)

　　三、X型题(每小题1分)

　　1. 可用作克隆载体的DNA分子有(BD)

　　A.染色体DNA B.病毒DNA C.细菌染色体DNA D.噬菌体DNA E.特殊的蛋白质

　　2.重组DNA基本过程包括(ABCDE)

　　A.目的基因的获取 B.克隆载体的构建 C.目的基因与载体的拼接

　　D.重组分子导入受体菌 E.转化菌的筛选

　　3.基因克隆又称(BC)

　　A. 重组RNA B.重组DNA C.DNA克隆 D.RNA克隆 E.蛋白质克隆

　　4.组成PCR反应体系的通常有(ABCDE)

　　A.DNA引物 B.耐热的DNA聚合酶 C. dNTP D.DNA模板 E.Mg2+

　　5.对于重组体的筛选，属直接选择法的有(BD)

　　A. 免疫化学法 B.Southern 印迹 C.酶联免疫法 D.标志补救 E.Westhern 印迹

　　6.对于重组体的筛选，属非直接选择法的有(ACE)

　　A.免疫化学法 B. Southern 印迹 C.酶联免疫法 D.标志补救 E.Westthern 印迹

　　7.限制性核酸内切酶切割DNA时，通常产生(ABD)

　　A.5'突出黏端 B.平末端 C. 3'磷酸末端 D. 3'突出黏端 E. 5'磷酸末端

　　8.基因工程中目的基因的来源可以是(ABDE)

　　A. 化学合成 B.PCR合成 C.LCR合成 D.cDNA文库 E. 基因组中直接获得

　　9.重组DNA时，外源基因又称(AC)

　　A.目的基因 B.目的RNA C.目的DNA D.外源RNA E. 载体基因

　　10.可作为重组DNA的目的基因有(CD)

　　A.mRNA B.cRNA C.cDNA D.DNA E.rRNA

　　四、填空题(每空0.5分)

　　1.通过自动获取或人为地供给外源______，使细胞或培养的受体细胞获得新的______，这就是转化作用。【DNA;遗传表型】

　　2.由__________和__________介导的基因移位或重排，称为转座。【插入序列;转座子】

　　3.一个完整的基因克隆过程应包括：目的基因的获取，______的选择与改造，_________和__________连接为重组DNA，重组DNA分子导入_________，筛选出含感兴趣基因的重组DNA转化细胞。【克隆载体;目的基因;载体DNA;受体细胞】

　　4.限制性核酸内切酶是一类识别并水解_________________的核酸___________酶。

　　【双链DNA特异序列;内切】

　　5.科学家感兴趣的外源基因又称___________，其来源有几种途径：化学合成，酶促合成cDNA，制备的基因组DNA及_________技术。【目的基因;PCR】

　　6.外源DNA离开染色体是不能复制的。将_______与______连接，构建成重组DNA分子，外源DNA则可被复制。 【外源基因;载体DNA】

　　7.根据克隆载体性质不同，将重组DNA分子导人细菌的方法有_______、________及感染。【转化;转染】

　　五、名词解释题(每小题2分)

　　1.质粒 【是存在于细菌染色体外的小型环状双链DNA分子。质粒分子本身是含有复制功能的遗传结构，能在宿主细胞独立自主地进行复制，并在细胞分裂时恒定地传给子代细胞。质粒带有某些遗传信息，所以会赋予宿主细胞一些遗传性状。因为质粒DNA有自我复制功能及所携带的遗传信息等特性，故可作为重组DNA操作的载体。】

　　2.限制性核酸内切酶 【就是识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类核酸内切酶。限制性核酸内切酶存在于细菌体内，与相伴存在的甲基化酶共同构成细菌的限制——修饰体系，限制外源DNA、保护自身DNA，对细菌遗传性状的稳定遗传具有重要意义。限制性核酸内切酶分为三类。重组DNA技术中常用的限制性内切核酸酶为Ⅱ类酶。】

　　3.载体 【即基因载体，或称克隆载体，是在基因工程中为“携带”感兴趣的外源DNA、实现外源DNA的无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子，具有自我复制和表达功能。其中，为使插入的外源DNA序列可转录,进而翻译成多肽链而特意设计的克隆载体又称表达载体。克隆载体有质粒DNA、噬菌体DNA和病毒DNA，它们经适当改造后仍具有自我复制能力，或兼有表达外源基因的能力。】

　　4.DNA克隆 【就是应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质——同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA与载体DNA结合成一个具有自我复制能力的DNA分子——复制子，继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子，即DNA克隆，又称基因克隆、重组DNA或基因工程。】

　　5.目的基因 【应用重组DNA技术有时是为分离、获得某一感兴趣的基因或DNA序列，或是为获得感兴趣基因的表达产物——蛋白质。这些感兴趣的基因或DNA序列就是目的基因，又称目的DNA。目的DNA有两种类型，即cDNA和基因组DNA。】

　　6.同源重组 【发生在同源序列间的重组称为同源重组，又称基本重组。同源重组的发生依赖两分子之间序列的相同或类似性。如果通过转化或转导获得的外源DNA与宿主DNA同源，那么外源DNA就可以通过同源重组方式整合进宿主染色体。】

　　7.cDNA文库 【以mRNA为模板，利用反转录酶合成与mRNA互补的DNA，即cDNA，再复制成双链cDNA片段，与适当载体连接后转入受体菌。不同细菌包含了不同mRNA为模板的cDNA分子或片段，这样生长的全部细菌所携带的各种cDNA分子或片段就代表了整个组织或细胞表达的各种mRNA信息，即cDNA文库。】

　　8.基因组DNA文库 【利用限制性核酸内切酶将染色体DNA切割成一定基因水平的许多片段，其中即含有人们感兴趣的基因片段。将这些片段分于与适当的克隆载体拼接成重组DNA分子，继而转入受体菌，使每个细菌内都携带一种重组DNA分子。不同细菌所包含的重组DNA分子可能为不同的染色体DNA片段，这样全部转化细菌所携带的各种染色体片段就代表了染色体的整个基因组。存在于转化细菌内、由克隆载体所携带的所有基因组DNA片段的集合称基因组DNA文库。基因组DNA文库涵盖了基因组全部基因信息。】

　　9.转座 【在基因组内有些基因可以从一个位置移动到另一位置。这些可移动的DNA序列包括插入序列和转座子。由插入序列和转座子介导的基因移位或重排现象称为转座。】

　　六、简答题

　　1.简述基因位点特异的重组和同源重组的差别。 (4分)

　　【位点特异的重组和同源重组概念;前者需要整合酶，发生在两个DNA序列的特异位点间;后者不需要特异DNA序列，而是依赖两分子之间序列的相同或类似性，但也需要特异酶催化。】

　　2.何谓限制性核酸内切酶?写出大多数限制性核酸内切酶识别DNA序列的结构特点。(3分)

　　【解释限制性内切核酸酶;酶识别DNA位点的核苷酸序列呈回文结构】

　　3.解释质粒，为什么质粒可作为基因载体。 (4分)

　　【参见“质粒”’名词解释;质粒的复制及表达功能、选择标志基因。】

　　七、论述题

　　1.何谓基因克隆?简述基因克隆的基本过程。 (7分)

　　【以质粒为载体进行DNA克隆的过程(为例)包括：目的基因的获取，基因载体的选择与构建，目的基因与载体的拼接，重组DNA分子导人受体细胞，筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞。】

　　2.何谓目的基因?写出其主要来源或途径。 (6分)

　　【参见“目的基因”名词解释。】

　　3. 何谓基因载体，说出哪些DNA可作为基因的载体。(5分)

　　【参见“基因载体”名词解释。】

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