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　　酶和代谢物分析技术

　　1.酶反应动力学定量时的观察对象是

　　A、总单位时间内酶的减少或增加的量

　　B、单位时间内酶的减少或增加的量

　　C、总反应时间内酶的减少或增加的量

　　D、总反应时间内底物减少或产物增加的量

　　E、总单位时间内底物减少或产物增加的量

　　参考答案: E

　　题目解析:酶反应动力学主要研究酶催化反应的过程与速率，以及各种影响酶催化速率的因素，定量时的观察对象是总单位时间内底物的减少或产物增加的量。

　　2.在酶活性测定的试剂中，哪一种试剂最重要( )。

　　A、活化剂种类和浓度

　　B、复构剂种类和浓度

　　C、抑制剂种类和浓度

　　D、辅因子的浓度

　　E、底物的种类和浓度

　　参考答案: E

　　3.温度对酶促反应的影响是

　　A、每增加10℃，酶促反应速度增加1～2倍

　　B、能降低酶促反应的活化能

　　C、超过37℃后，温度升高时，酶促反应变慢

　　D、一般地说，在25～35℃之间，温度每增加10℃，酶促反应速度增加1～2倍

　　E、温度可影响酶促反应的平衡点

　　参考答案: D

　　题目解析:化学速度随温度升高而加快，酶反应也不例外。Q10值即温度增加10℃，化学速度的变化率。酶的Q10值在1.5～2.5。其温度影响很大，不同的温度酶反应的速率不同，将直接影响测定结果。常规工作实验室越来越多的使用37℃。因为温度升高，反应速度快，灵敏度高。同时延滞时间和测定时间都可能缩短，从而有利于提高工作率。在37℃时，不可避免地一些酶可能失活

　　4.下列说法错误的是

　　A、以脱氢酶为指示酶的系统测定的是辅酶Ⅰ(NAD+)或辅酶(NADP+)在540nm处的吸光度增高来计算出被测物的浓度

　　B、最常用的耦联指示系统有两个：一个是脱氢酶系统，另一个为氧化酶系统。

　　C、可利用脱氢酶的逆反应，将NAD(P)H变为NAD(P)，测定340nm处吸光度的下降来计算被测物的浓度

　　D、终点法受到乳糜、黄疸和溶血的影响，测定时需设定样品空白

　　E、为了消除内源性脱氢酶的干扰，在反应时一般加入乳酸脱氢酶的抑制剂

　　参考答案: A

　　题目解析:以脱氢酶为指示酶的系统测定的是辅酶Ⅰ(NAD+)或辅酶(NADP+)在340nm处的吸光度增高来计算出被测物的浓度，也可利用脱氢酶的逆反应，将NAD(P)H变为NAD(P)，测定340nm处吸光度的下降来计算被测物的浓度。

　　5.SI制的酶单位Katal的含义( )。

　　A、每秒钟能催化1μmol底物的酶量为1Katal

　　B、每分钟能催化1μmol底物的酶量为1Katal

　　C、每秒钟能催化1个单位的底物的酶量为1Katal

　　D、每秒钟能催化1mol的底物的酶量为1Katal

　　E、每分钟能催化1个单位的底物的酶量为1Katal

　　参考答案: D

　　题目解析:近年来国际上大力推广SI制，我国已明确SI制为法定计量单位制，此时酶活性单位为Katal，即1秒中转化1个摩尔底物的酶量，常用单位为μKatal或nKatal。

　　6.在何种情况下反应速度可达最大反应速度

　　A、产物浓度足够大

　　B、底物浓度足够大

　　C、底物浓度足够小

　　D、产物浓度足够小

　　E、酶浓度足够小

　　参考答案: B

　　题目解析:在检测试剂中底物浓度、辅因子、活化剂、复构剂的种类和浓度均对酶的测定至关重要。其中以底物的种类和浓度最为重要。一般而言，在多种底物中，Km最小的底物往往是此酶的生理底物。选择Km小的底物测定酶还有一个优点，就是在最大反应速度V的底物浓度也将最低。在实际工作中可能意味着试剂成本可能较低，不易出现底物难溶解的困难。

　　7.关于酶活性国际单位下列说法正确的是

　　A、1s能转化1微摩尔底物(μmol)的酶量为一个国际单位(μmol/min)

　　B、1min能转化1微摩尔底物(μmol)的酶量为一个国际单位(μmol/min)

　　C、1h能转化1微摩尔底物(μmol)的酶量为一个国际单位(μmol/min)

　　D、1min能转化1微摩尔底物(mmol)的酶量为一个国际单位(mmol/min)

　　E、1h能转化1微摩尔底物(mmol)的酶量为一个国际单位(μ=mmol/min)

　　参考答案: B

　　题目解析:酶活性国际单位是1min能转化1微摩尔底物(μmol)的酶量为一个国际单位(μmol/min)。

　　8.下列说法错误的是

　　A、在检测试剂中底物浓度、辅因子、活化剂、复构剂的种类和浓度均对酶的测定至关重要

　　B、以底物的种类和浓度最为重要

　　C、米氏方程在选择酶测定底物浓度有着重要的指导作用

　　D、在多种底物中，Km最大的底物往往是此酶的生理底物

　　E、pH影响酶的稳定

　　参考答案: D

　　题目解析:一般而言，在多种底物中，Km最小的底物往往是此酶的生理底物。选择Km小的底物测定酶还有一个优点，就是在最大反应速度V的底物浓度也将最低。在实际工作中可能意味着试剂成本可能较低，不易出现底物难溶解的困难。

　　9.影响酶活性测定的因素下列选项最合适的是

　　A、试剂中表面活性剂的作用

　　B、酶反应的最适pH

　　C、最适温度

　　D、底物浓度

　　E、以上都是

　　参考答案: E

　　题目解析:影响酶活性的因素包括底物的浓度、酶反应的最适pH、最适温度、酶的抑制作用，另外还包括试剂中表面活性剂的作用等因素。

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